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La dissémination péritonéale est l'une des complications majeures des cancers digestifs. Le cancer du pancréas est une maladie redoutable avec un pronostic sombre. La thérapie génique peut être une alternative aux échecs des modalités thérapeutiques classiques. Cependant dans cette approche, l'une des difficultés est de trouver un compromis entre l'efficacité thérapeutique et le mode de transfert des vecteurs transgènes.

Nous nous proposons d'étudier l'efficacité du transfert d'un double gène suicide (HSV-thymidine kinase et E. coli-cytosine déaminase/uracil phophoribosyltransférase = HSV-tk/eCD-UPRT) avec un lipide cationique, le bis-guanidium-tren-cholesterol (BGTC) sur un modèle de carcinose (dissémination) péritonéale d'origine pancréatique.

Une semaine après injection de 5.10⁶ cellules tumorales pancréatiques BxPc3 (antigène carcinoembryonnaire : ACE sécrétantes) dans le péritoine de souris athymiques, les animaux ont été répartis en 6 groupes : témoin, BGTC/tk-CD, BGTC/GFP, BGTC/LacZ, BGTC et HSV-tk/eCD-UPRT seuls. Les complexes ADN (50 &mgr;g) avec ou sans BGTC ont été injectés 3 fois à 12h d'intervalle. 48 h après la dernière injection, les animaux ont été traités pendant 12 j par GCV (50 mg/kg/j) et 5FC (250 mg/kg/j) ou NaCl 0,9 %. Le sang a été collecté tous les 5 j ; 2 souris de chaque groupe ont été sacrifiées à J2, J5 et J25 pour des biopsies. Des dosages sériques d'ACE par ELISA, l'analyse semi-quantitative de l'expression de HSV-tk et eCD-UPRT (par rapport à celle de GAPDH) par RT-PCR, des études histologiques (LacZ) et mesures du GFP par fluorométrie ont été effectuées. Un suivi en survie actuarielle a été évalué.

Les nodules tumoraux prélevés au niveau du péritoine des parois abdominales, du pancréas et les ganglions mésentériques des souris Nudes ayant reçu le complexe (HSV-tk/eCD-UPRT/BGTC) présentent une expression significative de HSV-tk, de eCD-UPRT, de GFP et de l'activité enzymatique b-Gal. Dans les tissus des souris traitées par ADN nu, l'expression de ces gènes est indécelable ou très faible (à J2). Tous les prélèvements à J25 se sont révélés négatifs. Le dosage d'ACE révèle une inhibition significative de ce marqueur dans les groupes HSV-tk/eCD-UPRT/BGTC et traités par GCV et 5FC montrant indirectement que le transfert du vecteur recombinant HSV-tk/eCD-UPRT a bien réduit la dissémination cancéreuse et améliore la survie des animaux traités.

L'ensemble de ces résultats montre l'intérêt thérapeutique de l'approche double gène suicide et de l'emploi de ce lipide cationique, le BGTC, dont l'efficacité dans le transfert de gènes mérite d'être confirmée.