Résumé selectionné

	lundi 5 avril 2004
	Symposium

Régulations post-traductionnelles de la protéine homéotique Cdx2 dans les cellules intestinales

I Gross⁽¹⁾ , C Domon-dell⁽¹⁾ , M Kedinger⁽¹⁾ , JN Freund⁽¹⁾

⁽¹⁾ INSERM, U.381, Strasbourg

Mots clés :
60 Biologie Moléculaire, Génétique
68 Côlon, Rectum
88 Noyau, Expression Des Gènes, Transfert Des Gènes

Introduction

Le contrôle de la morphogenèse et de l'homéostasie intestinale est un phénomène complexe qui fait intervenir de multiples voies de signalisation. Celles-ci modulent l'expression et l'activité de facteurs de transcription tel que Cdx2, qui définit l'identité intestinale et contrôle la prolifération et la différenciation des cellules de l'épithélium. Nous étudions les modifications post-traductionnelles qui régulent l'activité de Cdx2.

Résultats

Par western blot, Cdx2 est détectée sous forme de triplet dans un grand nombre de lignées intestinales et dans des conditions de culture variées (prolifération, différenciation, privation en sérum). Les bandes supérieures de ce triplet disparaissent après traitement par la phosphatase alcaline, ce qui suggère fortement que Cdx2 est phosphorylée de manière constitutive. Dans un premier temps, l'identification de la voie de signalisation impliquée dans la phosphorylation de Cdx2 a été entreprise par l'emploi d'inhibiteurs spécifiques de kinases et de tests de phosphorylation in vitro. En parallèle, la mutagenèse de sites consensus de phosphorylation nous a permis d'identifier une sérine cruciale pour la phosphorylation de Cdx2. Ce résidu appartient à un groupe de quatre sérines semblables au motif impliqué dans la phosphorylation et la dégradation de la β -caténine par la voie Wnt. A l'aide de gènes rapporteurs, nous avons testé l'impact de ce motif sur l'activité transcriptionnelle de Cdx2 et observé un effet inhibiteur de la phosphorylation. Afin de comprendre le rôle de cette phosphorylation, nous comparons les propriétés moléculaires des protéines Cdx2 sauvages et mutantes (stabilité, localisation intracellulaire, fixation à l'ADN, liaison aux partenaires moléculaires).

Conclusion

En conclusion, l'activité de la protéine Cdx2 est dépendante de modifications post-traductionnelles. Or, l'altération de l'expression de cdx2 chez des souris cdx2⁺^/- facilite la progression de cancers colorectaux induits chimiquement par l'AOM et l'expression de cdx2 est réduite au cours de la cancérogenèse colique. Ainsi, la caractérisation des mécanismes de régulation de l'expression et de l'activité de Cdx2 constitue un objectif important dans la compréhension des pathologies intestinales.