Résumé selectionné
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lundi 5 avril 2004 |
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Poster |
F El Yafi(2) , R Winkler(1) , N Boussif(1) , J Belaiche(2) , E Louis(2)
(1) Laboratoire d'Oncologie Moléculaire, CHU de liège, Liège, Belgique
(2) Service de Gastroentérologie, CHU de liège, Liège, Belgique
Mots clés :
19 Maladies Inflammatoires Intestinales : Fondamental,Etiologie, Génétique
88 Noyau, Expression Des Gènes, Transfert Des Gènes
89 Membranes, Récepteurs, Signalisation, Transport
Introduction
L'IGF1, qui est surexprimé dans la maladie de Crohn, pourrait jouer un rôle dans la sténose intestinale par ses propriétés pro-fibrosantes. Nous avons précédemment montré par immunohistochimie qu'il existe une expression anormale du Récepteur aux IGFs de type 1 (RIGF1) au niveau de l'intestin atteint de maladie de Crohn. Un nombre accru de cellules inflammatoires et de fibroblastes expriment le RIGF1 dans la maladie de Crohn, essentiellement en zone sténosante. Le but de cette étude est de confirmer cette surexpression par des techniques quantitatives.
Matériels et Méthodes
A partir de fragments chirurgicaux intestinaux transpariétaux nous avons pu extraire d'une part l'ARN chez 5 patients atteints de maladie de Crohn et 4 contrôles (provenant des marges saines de résection d'adénocarcinomes coliques) et d'autre part les protéines totales chez 4 patients atteints de maladie de Crohn. Nous avons réalisé une RT-PCR semi-quantitative afin d'évaluer l'expression des gènes RIGF1 et IGF1 au niveau de l'intestin normal et atteint de maladie de Crohn. L'analyse de l'expression de la protéine RIGF1 a été effectuée par immunoprécipitation des protéines totales suivie d'un Western Blot avec un anticorps anti-RIGF1. Une lignée cellulaire exprimant fortement RIGF1 (BT-474) a servi de témoin positif pour le Western Blot.
Résultats
L'ARNm de RIGF1 et IGF1 est exprimé au niveau de l'intestin normal et atteint de maladie de Crohn. Cette expression est plus forte dans la maladie de Crohn par rapport à l'intestin normal avec toutefois une certaine hétérogénéité individuelle. Dans la maladie de Crohn, il existe une surexpression de l'ARNm de RIGF1 et/ou de son ligand IGF1 en zone fibrosante par rapport à la zone saine du même patient dans tous les cas (surexpression de RIGF1 dans 3 cas sur 5 ; de IGF1 dans 4 cas sur 5 ; de RIGF1 et IGF1 dans 2 cas sur 5). Quant à la protéine RIGF1, elle est fortement exprimée (comparée à l'expression dans la lignée BT-474) chez 4 patients sur 4 atteints de maladie de Crohn et cette expression est supérieure en zone fibrosante chez 3 patients sur 4.
Conclusion
La surexpression de RIGF1, confirmée dans cette étude, ainsi que celle de IGF1, suggère fortement l'existence d'une suractivation de RIGF1 dans la maladie de Crohn sténosante. Cette suractivation de RIGF1 au niveau des cellules inflammatoires et des fibroblastes interviendrait dans le développement de la fibrose intestinale.