Résumé selectionné

L'invasion tumorale est une étape clé de la progression du cancer colorectal, durant laquelle les cellules tumorales à fort potentiel invasif vont diffuser au travers de la membrane basale afin de former des métastases. Ce processus est caractérisé par une activité protéolytique très importante, assurée par diverses familles d'endoprotéases. Parmi elles, nous nous sommes intéressés aux métalloprotéases matricielles (MMPs), et plus particulièrement à la matrilysine (MMP7), unique de par sa structure, son spectre d'activité, son expression et sa sécrétion exclusive par les cellules tumorales. Notre étude a porté sur l'analyse de l'expression de la MMP7 en présence et en absence de bombésine. Il a précédemment été montré que ce neuropeptide, qui correspond au Gastrin Releasing Peptide des mammifères, stimulait l'invasion et la migration des cellules de la lignée d'adénocarcinome colique humain Isreco1 (1).

Des marquages immuno-cytochimiques nous ont permis de détecter la MMP7 chez Isreco1. Par immuno-précipitation puis western blotting, nous avons confirmé ce résultat et observé une forte augmentation du niveau d'expression protéique de la MMP7 dans le surnageant de culture des cellules dès 12 h de traitement par de la bombésine à la concentration de 100 nM. Dans un second temps, nous avons testé l'effet de la bombésine sur la transcription du gène de la MMP7. La technique de RT-PCR semi-quantitative nous a permis de vérifier que le transcrit était surexprimé dans les cellules incubées en présence de bombésine et que cette surexpression était dépendante du temps. Par la technique de RT-PCR quantitative (Light Cycler), nous avons montré une augmentation par un facteur 13 du taux d'ARNm de la MMP7 dans les cellules après 12 h et 18 h d'exposition à la bombésine, et d'un facteur 2,5 après 24 h de traitement. Des expériences similaires ont été réalisées pour suivre le niveau d'expression du TIMP1, l'inhibiteur endogène de la MMP7, lequel n'a pas augmenté au cours du temps, ce qui montre que la bombésine n'exerce aucun effet régulateur sur l'expression du TIMP1.

Nos résultats montrent que la bombésine augmente l'expression de la matrilysine dans la lignée de cancer colique humain Isreco 1. La recherche d'un rôle fonctionnel de cette augmentation sur la migration et l'invasion cellulaire est en cours.