Résumé selectionné

	mardi 6 avril 2004
	Poster

Les analogues de la somatostatine inhibent l'angiogenèse induite par la lignée de carcinome hépatocellulaire HepG2 par deux mécanismes complémentaires

G Gouysse⁽¹⁾ , M Nejjari⁽¹⁾ , C Pourreyron⁽¹⁾ , J Dumortier⁽¹⁾ , JY Scoazec⁽¹⁾

⁽¹⁾ INSERM U45, Hôpital Edouard Herriot, Lyon

Mots clés :
61 Prolifération, Carcinogenèse
71 Foie, Voies Biliaires
87 Interactions Cellule-Cellule Et Cellule-Matrice

Introduction

Les analogues de la somatostatine (SMS-A) possèdent des propriétés anti-angiogéniques bien documentées in vitro mais dont peu d'applications cliniques ont été tentées. Le but de notre travail était de tester in vitro les capacités de l'octréotide à inhiber l'angiogenèse induite par la lignée de carcinome hépatocellulaire HepG2 dans un modèle de coculture indirecte et d'en analyser les mécanismes.

Matériels et Méthodes

Un modèle de coculture indirecte entre des cellules HepG2 et des cellules endothéliales isolées de veine ombilicale fotale (HUVEC) a été développé dans des chambres de Boyden modifiées. Les effets angiogéniques des cellules tumorales ont été évalués à l'aide de tests fonctionnels (prolifération et migration). Les effets de l'octréotide ont été testés à la concentration de 10-7M.

Résultats

Dans notre modèle, les cellules HepG2 stimulent de manière significative la prolifération des HUVEC et leur migration (respectivement, de 250 % et 180 % par rapport aux contrôles). Les effets des cellules HepG2 sont médiés par le VEGF, comme le démontre l'inhibition quasi-complète de la stimulation de la prolifération endothéliale par l'adjonction d'anticorps anti-VEGF dans le système. La protéine VEGF est détectable dans le milieu de culture des cellules HepG2 (concentration moyenne: 5200 pg/µL) et les ARNm correspondants sont détectables par PCR dans le lysat cellulaire. L'octréotide inhibe significativement la prolifération des HUVEC (de 74 % par rapport au contrôle) sans modifier la prolifération des HepG2 : nous avons vérifié que celles-ci n'expriment pas le récepteur sst-2 de la SMS mais expriment sst-5. De plus, l'octréotide induit une diminution significative de la quantité d'ARNm du VEGF détecté par hybridation quantitative dans les cellules HepG2 (Quantikine, R&D Systems). La concentration de la protéine VEGF dans le milieu de culture diminue progressivement au cours du temps.

Conclusion

Notre étude montre que l'octréotide inhibe la prolifération des HUVEC induite par les cellules HepG2 grâce à deux mécanismes complémentaires : un mécanisme direct, passant par l'inhibition de la prolifération des HUVEC, et un mécanisme indirect, passant par l'inhibition de la synthèse et de la sécrétion du VEGF par les cellules tumorales et dépendant probablement du récepteur sst-5. Ces résultats pourraient justifier la conception de stratégies thérapeutiques cherchant à exploiter in vivo les propriétés anti-angiogéniques des SMS-A.