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Caractérisation de la muqueuse colique saine et adénocarcinomateuse sur coupes tissulaires congelées par microspectroscopie Raman
PJ Guillou(1) , A Beljebbar(3) , D Eudes(3) , O Bouché(2) , MD Diebold(1) , G Thiéfin(2) , M Manfait(3) (1) Laboratoire d'Anatomie Pathologique, CHU Reims, Reims Cedex (2) Service d'Hépato Gastroentérologie, CHU Reims, Reims Cedex (3) Unité MEDIAN, CNRS UMR 6142, UFR de Pharmacie, Reims Cedex Mots clés :
IntroductionLa microspectroscopie Raman est une méthode très informative qui permet de produire rapidement sous microscope des images moléculaires à partir d'échantillons tissulaires sans coloration préalable. Ces images construites sur des critères spectroscopiques ont permis dans certaines applications de différencier tissu sain et tissu cancéreux. But : évaluer les performances de la microspectroscopie Raman sur coupes tissulaires congelées pour le diagnostic d'adénocarcinome colique versus muqueuse saine.
Patients et MéthodesVingt six échantillons d'adénocarcinome colique couplés à un prélèvement de muqueuse saine sur la même pièce opératoire ont été congelés et analysés sur coupes de 4 x 7 mm et 15 microns d'épaisseur par microspectroscopie Raman dans le proche infrarouge (spectromètre LABRAM, JOBIN YVON). Des images spectrales ont été générées et analysées avec des méthodes statistiques multivariées (ACP, PLS, clustering).
RésultatsDe 1500 à 2000 spectres ont été obtenus pour chaque coupe. Une classification hiérarchique ascendante réalisée sur les modèles spectraux associés aux échantillons a permis de séparer l'ensemble en deux classes. La confrontation anatomopathologique a permis de montrer que ces deux classes correspondaient respectivement aux tissus sains et tumoraux. De plus, l'analyse des images spectrales a permis de générer des marqueurs spectroscopiques (marqueurs moléculaires) associés aux deux types de tissus.
ConclusionLa microspectroscopie Raman se révèle une technique rapide et puissante pour le diagnostic d'adénocarcinome colique sur matériel ex vivo. L'affinement des marqueurs spectroscopiques pourrait permettre d'identifier des types de tumeurs de pronostic différent.
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