Résumé selectionné

	mercredi 7 avril 2004
	Poster

Effet anti-prolifératif des polyphénols de l'olivier sur les lignées cancéreuses coliques humaines

C Guichard⁽⁴⁾ , E Pedruzzi⁽⁴⁾ , G Lizard⁽¹⁾ , C Elbim⁽²⁾ , MC Dang⁽⁴⁾ , J El Benna⁽⁴⁾ , MA Gougerot-Pocidalo⁽⁴⁾ , F Driss⁽³⁾ , E Ogier-denis⁽⁴⁾

⁽¹⁾ Unité INSERM 498, Hôpital du Bocage, Dijon
⁽²⁾ Laboratoire d'Immunologie-Hématologie, Hôpital Bichat, Paris
⁽³⁾ Service de Biochimie Hormonale et Génétique, Hôpital Bichat, Paris
⁽⁴⁾ Unité INSERM 479, Faculté Xavier Bichat, Paris

Mots clés :
61 Prolifération, Carcinogenèse
89 Membranes, Récepteurs, Signalisation, Transport
58 Nutriments Et Fonction Intestinale

Introduction

Des études épidémiologiques suggèrent que le régime alimentaire méditerranéen riche en fruits, légumes et huile d'olive est protecteur vis-à-vis des maladies cardiovasculaires et de certains cancers. L'hydroxytyrosol ou DPE, composant phénolique majeur de l'huile d'olive, est un puissant anti-oxydant et anti-prolifératif (lignée HL-60). Plus récemment, l'effet anti-oxydant a été retrouvé dans les polyphénols naturels des margines de l'huile d'olive (Wo). Le but de notre étude est de confirmer l'effet anti-oxydant de Wo et de rechercher une potentialité antiproliférative en induisant spécifiquement la mort de cellules cancéreuses coliques humaines sans pour autant modifier l'homéostasie des cellules normales.

Matériels et Méthodes

L'effet anti-oxydant a été évalué sur l'explosion oxydative des polynucléaires (isolés et sang total) et sur la production intracellulaire d'H₂O₂ dans les cellules HT-29. L'effet antiprolifératif de Wo a été étudié : 1) sur des cultures primaires de cellules (cellules musculaires lisses humaines, monocytes et macrophages humains, hépatocytes de rat) ; 2) et sur différentes lignées cancéreuses coliques humaines (HT-29, SW480, HCT-116). L'apoptose est caractérisée par cytométrie en flux (annexine V/iodure de propidium, DIOC6) et Western blot (cytochrome c, caspases, protéines de la famille bcl-2).

Résultats

Wo exerce un effet anti-oxydant en diminuant la production de formes réactives de l'oxygène dans les différents modèles étudiés. De plus, Wo induit une diminution temps- et dose-dépendante de la viabilité des différentes lignées cancéreuses alors qu'aucun effet cytotoxique n'est détecté sur les cultures primaires testées. L'efficacité pro-apoptotique de Wo est dépendante de l'état prolifératif des cellules (45-50 % de cellules annexinV+/PI-). Wo induit une dépolarisation mitochondriale (DIOC6) associée à la libération cytosolique de cytochrome c. L'implication de la caspase 3 dans cet effet cytotoxique est démontrée par Western blot (anti caspase 3 active) et par l'effet différentiel de Wo sur la lignée MCF-7 transfectée ou non par la procaspase 3. Nous montrons que Wo induit une baisse de l'expression de protéines anti-apoptotiques (Bcl-2) et une augmentation de l'expression de protéines pro-apoptotiques (Bid, Bad).

Conclusion

Nos résultats confirment l'effet anti-oxydant de Wo et démontrent pour la première fois, que l'effet protecteur de l'huile d'olive pourrait être lié à l'induction d'une apoptose ciblée des cellules tumorales coliques par ces polyphénols naturels. Cette activité antiproliférative permettrait ainsi d'envisager de nouvelles approches dans la prévention et le traitement des pathologies cancéreuses et inflammatoires colorectales.