Résumé selectionné

Des études récentes ont mis en évidence le rôle des neurones du système nerveux entérique (SNE) dans le contrôle de fonctions de la barrière épithéliale intestinale telles que la prolifération ou la régulation de l'expression de protéines de jonctions. Néanmoins, le rôle de la glie entérique, l'autre composante du SNE, dans le contrôle de ces fonctions est inconnu. Aussi, le but de cette étude a été de caractériser l'influence de la glie entérique sur le contrôle de la prolifération de l'épithélium digestif au moyen d'un nouveau modèle de co-culture.

Des cellules gliales entériques (CGE) transformées ont été ensemencées dans une plaque de 12 puits et maintenues en culture jusqu'à confluence. Les cellules épithéliales Caco-2 ont ensuite été ensemencées dans des filtres Transwell 12 puits à une densité de 70000 cellules/puit. Le lendemain, les filtres de Caco-2 ont été transférés dans les puits contenant les CGE et maintenues en co-culture pendant trois jours. La prolifération de Caco-2 a été évaluée par incorporation de thymidine ³H et par mesure de la résistance des filtres. La protéine associée aux jonctions serrées, ZO-1, a été étudiée dans Caco-2 à la fois au niveau de l'expression de la protéine (immunohistochimie) et de son ARNm (PCR en temps réel).

La co-culture de CaCo-2 en présence de CGE induisait une augmentation de la prolifération de Caco-2 par rapport à la culture de Caco-2 seule (témoin). En effet, dès 24 h de co-culture avec CGE, on observait une augmentation de l'incorporation de thymidine ³H par rapport au témoin. Cet effet était associé à une augmentation de la résistance des filtres de 420 ± 230 % (n = 5) après 48 h et de 966 ± 450 % (n = 4) après 72 h par rapport au témoin. Les effets de la co-culture en présence de CGE étaient reproduits en cultivant CaCo-2 en présence de surnageant de CGE cultivées seules. Il existait une diminution significative de l'ARNm de ZO-1 (- 65 ± 30 % ; n = 4) à 48 h en présence de CGE par rapport au témoin. Cet effet s'accompagnait dans le cytoplasme cellulaire d'une redistribution de ZO-1 associée aux filaments d'actine.

Nos résultats montrent que la glie entérique pourrait être impliquée dans le contrôle de la prolifération cellulaire et de la perméabilité de la barrière épithéliale intestinale. Les mécanismes de cette régulation demeurent à élucider mais ils pourraient jouer un rôle important dans les phénomènes de réparation de la barrière épithéliale intestinale en réponse à une agression.