Résumé selectionné

	mercredi 7 avril 2004
	Communication Orale

Activation de la voie JAK2/STAT3 par un récepteur couplé aux protéines G, le RCCK-2, dans les cancers pancréatiques

A Ferrand⁽¹⁾ , A Kowalski-Chauvel⁽¹⁾ , C Escrieut⁽¹⁾ , A Mathieu⁽¹⁾ , L Pradayrol⁽¹⁾ , D Fourmy⁽¹⁾ , M Dufresne⁽¹⁾ , C Seva⁽¹⁾

⁽¹⁾ U.531, Institut Louis Bugnard - CHU Rangueil, Toulouse

Mots clés :
70 Pancréas Exocrine
61 Prolifération, Carcinogenèse
80 Physiologie, Biologie Cellulaire

Introduction

La gastrine, hormone digestive, est un facteur de croissance pour les cellules pancréatiques normales ou tumorales. Au cours du développement, elle est exprimée au stade fotal dans le pancréas. Elle induit ses effets par l'intermédiaire d'un récepteur couplé aux protéines G, le RCCK-2. Les souris Elas-CCK2, surexprimant ce récepteur dans les acini pancréatiques, développent des lésions pré-néoplasiques et, à plus long terme, des tumeurs du pancréas. Ceci suggère l'implication de la gastrine et de son récepteur dans les stades précoces du processus tumoral pancréatique. Récemment, le rôle de STAT3, un facteur de transcription impliqué dans l'initiation et la progression de nombreux cancers humains, a été démontré dans la carcinogenèse pancréatique. Les STATs sont des effecteurs des tyrosine-kinases de la famille JAKs. Parmi elles, JAK2 est la mieux connue pour intervenir dans les processus tumoraux.

Notre but était de déterminer si la gastrine et le R-CCK2 activent JAK2 et STAT3, et d'étudier les mécanismes impliqués dans cette activation.

Résultats

L'analyse immuno-histologique des coupes de pancréas de souris Elas-CCK2 comparée à celle d'animaux contrôles a mis en évidence une augmentation du marquage des formes actives de JAK2 et de STAT3. Dans les cellules tumorales pancréatiques AR4-2J, après immuno-précipitation et activité kinase in vitro, nous avons détecté une activation précoce de JAK2 et une phosphorylation consécutive de STAT3 maximale entre 30 et 60 minutes. La co-immunoprécipitation de JAK2 et STAT3 nous a permis de démontrer une association des deux protéines induite par la gastrine. De plus, l'AG 490, inhibiteur spécifique de JAK2, bloque l'activation de STAT3 induite par le peptide. Précédemment, les études fonctionnelles du RCCK-2 dans les cellules COS-7 ont montré l'implication du motif NPXXY dans l'activation des voies de transduction du signal couplées à la sous unité alpha q des protéines G. Ici, après transfection du RCCK-2 muté sur ce motif, et donc inactif sur les voies alpha q dépendantes, nous constatons un défaut d'activation de JAK2 par le récepteur en réponse à la gastrine. D'autre part, les cellules COS-7 transfectées transitoirement avec un mutant constitutif d'alpha q montrent une suractivation de la protéine JAK2 endogène.

Conclusion

Nos résultats décrivent pour la première fois l'implication d'alpha q dans l'activation des JAKs. Nous démontrons le rôle du motif NPXXY et d'alpha q dans l'activation de JAK2 par le RCCK2. In vitro, nous montrons l'induction de la voie JAK2/STAT3 dans une lignée pancréatique tumorale par la gastrine. In vivo, nous constatons une suractivation de cette voie dans le pancréas de souris surexprimant le RCCK2 et développant un processus tumoral. Ces résultats confortent l'idée de la participation de la gastrine et de son récepteur dans les stades précoces de la carcinogenèse pancréatique.