Résumé selectionné

	lundi 5 avril 2004
	Symposium

Le butyrate modifie l'expression de certains gènes de la glycosylation dans des cellules épithéliales mucosécrétrices de côlon humain

E Gaudier⁽²⁾ , L Forestier⁽¹⁾ , R Julien⁽¹⁾ , P de Coppet⁽²⁾ , C Hoebler⁽²⁾

⁽¹⁾ Unité de Génétique moléculaire animale UMR 1061, INRA - Université de Limoges, Limoges
⁽²⁾ Unité des Fonctions Digestives et de nutrition humaine, INRA - CRNH, Nantes

Mots clés :
88 Noyau, Expression Des Gènes, Transfert Des Gènes
58 Nutriments Et Fonction Intestinale

Introduction

Le butyrate, acide gras à chaîne courte produit par la fermentation bactérienne de fibres, participe au maintien de l'intégrité de l'épithélium colique car il constitue la principale source d'énergie des colonocytes. Le butyrate augmente la sécrétion des mucines, glycoprotéines composant la couche de mucus protectrice tapissant l'épithélium du côlon. Nous avons montré dans une précédente étude que le butyrate est capable de stimuler l'expression des gènes MUC, codant pour la partie protéique des mucines. Le but de cette étude était de déterminer si le butyrate agit également sur l'expression de gènes impliqués dans le processus de glycosylation, qui participent à la glycosylation des mucines et, donc, aux propriétés protectrices du mucus.

Matériels et Méthodes

La lignée de cellules épithéliales de côlon humain polarisées et sécrétrices de mucus HT29-Cl.16E a été cultivée sur filtres perméables. Le butyrate a été appliqué à 2 mM dans le milieu apical des monocouches cellulaires, dans du milieu contenant ou dépourvu de glucose, afin de se rapprocher des conditions du contact butyrate - colonocytes in vivo. Les variations d'expression ont été mesurées par hybridation sur des puces à ADN comportant des sondes d'ADNc correspondant à 250 enzymes impliquées dans la glycosylation.

Résultats

L'effet majeur du butyrate est la stimulation très importante de l'expression de la galectine 1, codée par le gène LGALS1, en présence et en absence de glucose. En milieu contenant du glucose, le butyrate stimule aussi sensiblement l'expression de l'UDP glucuronosyltransférase codée par le gène UGT1A6, et de la galactose 3-O-Sulfotransferase codée par le gène GAL3st4. En milieu privé de glucose, le butyrate augmente modérément l'expression de trois sialyl-transferases : ST6GALNAC VI, ST3GAL II 5' et ST3GAL V. De plus, il diminue l'expression de trois enzymes impliquées dans l'ancrage de protéines à une membrane : la PGNase, la PIGK, et la SL15. Ces résultats obtenus sur puces à ADN sont en cours de confirmation et de quantification par RT-PCR en temps réel.

Conclusion

Le butyrate est donc capable de moduler la transcription de certaines enzymes impliquées dans la glycosylation dans des cellules épithéliales humaines mucosécrétrices. Les effets différents obtenus en absence ou en présence de glucose suggèrent un rôle clé du métabolisme du butyrate dans ces effets. Si l'action modulatrice du butyrate sur les gènes impliqués dans la glycosylation se traduit effectivement au niveau de la glycosylation des mucines, elle pourrait être une composante clé de la contribution du butyrate à la protection de l'épithélium par le mucus.