Résumé selectionné

	mardi 6 avril 2004
	Poster

Analyse globale de la réponse de Helicobacter pylori à l'acidité gastrique

S Bury-Moné⁽²⁾ , J Thiberge⁽²⁾ , M Contreras⁽²⁾ , A Maitournam⁽¹⁾ , A Labigne⁽²⁾ , H de Reuse⁽²⁾

⁽¹⁾ Institut Pasteur, PF2 Puces à ADN, Paris
⁽²⁾ Institut Pasteur, Unité de Pathogénie Bactérienne des Muqueuses, Paris

Mots clés :
10 Helicobacter Pylori : Fondamental, Epidémiologie

Introduction

La virulence de Helicobacter pylori (Hp) est liée à sa capacité exceptionnelle à résister aux variations importantes de pH qu'elle rencontre dans l'estomac. Lors de son passage dans la lumière stomacale (pH médian de 1,4), Hp résiste à un choc acide grâce à un réponse très rapide faisant intervenir son uréase et UreI. Le site de colonisation de Hp est la muqueuse gastrique, un environnement favorable à sa multiplication, présentant un pH entre 5 et 6. Peu d'éléments étaient connus sur la réponse de Hp face à cette acidité modérée. Nous avons cherché à définir cette réponse en : (i) comparant l'ensemble des transcrits (transcriptome) exprimés par Hp lors d'une croissance à pH 7 et à pH 5, (ii) analysant les réseaux de régulation mis en jeu et, (iii) explorant la relation entre cette réponse adaptative et les facteurs de virulence de Hp.

Matériels et Méthodes

Des puces à ADN (DNA-macroarrays, Eurogentec) ont été utilisées pour comparer l'ensemble des ARNm exprimés par Hp 26695 ayant poussé en phase exponentielle en milieu liquide à pH 7 ou 5. Pour une sélection de gènes, nous avons réalisé des expériences de validation par RT-PCR en temps réel, dot blots et dosages enzymatiques. Les réseaux de régulation ont été explorés par des dosages d'activités enzymatiques à partir de mutants de la souche 26695 déficients dans des régulateurs transcriptionnels.

Résultats

Lors d'une croissance de Hp en milieu modérément acide, l'expression de 56 gènes est significativement augmentée, celle de 45 gènes est diminuée. Parmi les fonctions régulées, nous observons des modifications des enveloppes bactériennes, une augmentation de la mobilité et de la production, par l'uréase et les amidases, d'un composé au pouvoir neutralisant, l'ammoniac. D'autre part, nos résultats indiquent une moindre expression de la cytotoxine VacA, de l'adhésine SabA et d'un facteur pro-inflammatoire OipA. Trois régulateurs transcriptionnels sont impliqués dans cette réponse : deux répresseurs dépendants des métaux, NikR (nickel) et Fur (fer) et un activateur de système à deux composants, OmpR.

Conclusion

La place majeure tenue par la production d'ammoniac et l'intervention du régulateur NikR marquent la spécificité de la réponse adaptative à l'acidité de Hp. De plus, nos résultats révèlent un lien étroit entre réponse à l'acidité, résistance aux métaux et virulence chez ce pathogène gastrique.