Résumé selectionné

	mercredi 7 avril 2004
	Communication Orale

La translocation du peptidoglycane de Hélicobacter pylori par l'îlot Cag induit une réponse inflammatoire dépendante de Nod1 dans les cellules épithéliales gastriques

J Viala⁽⁵⁾ , C Chaput⁽⁶⁾ , IG Boneca⁽⁶⁾ , A Cardona⁽²⁾ , SE Girardin⁽³⁾ , AP Moran⁽¹⁾ , MR Huerre⁽²⁾ , PJ Sansonetti⁽³⁾ , A Labigne⁽⁶⁾ , J Bertin⁽⁴⁾ , DJ Philpott⁽⁵⁾ , RL Ferrero⁽⁶⁾

⁽¹⁾ Département of Microbiology, National University of Ireland, Galway, Irlande
⁽²⁾ Unité de Recherche & d'Expertise Histotechnologie et Pathologie, Institut Pasteur, Paris
⁽³⁾ Unité de Pathogénie Microbienne Moléculaire, INSERM U.389, Institut Pasteur, Paris
⁽⁴⁾ MDS Proteomics, Inc., 251 Attwell Drive, Toronto (Ontario), Canada
⁽⁵⁾ Groupe d'Immunité Innée et Signalisation, Institut Pasteur, Paris
⁽⁶⁾ Unité de Pathogénie Bactérienne des Muqueuses, Institut Pasteur, Paris

Mots clés :
10 Helicobacter Pylori : Fondamental, Epidémiologie

Introduction

Le but du travail était d'élucider le mécanisme par lequel les souches de Hélicobacter pylori (Hp) possédant un îlot Cag fonctionnel (PAI+) induisent l'activation de NF-kappaB et la synthèse d'IL-8 dans les cellules épithéliales gastriques. Des résultats antérieurs ont montré que Nod1, une molécule intra-cytoplasmique jouant un rôle dans la reconnaissance des pathogènes, était impliquée dans la réponse des cellules épithéliales aux bactéries à Gram négatif. Cette observation nous a conduit à rechercher le rôle de Nod1 dans la reconnaissance de Hp lors de son interaction avec les cellules épithéliales.

Matériels et Méthodes

L'induction de NF-kappaB par des souches parentales ou mutantes de Hp, ainsi que par du peptidoglycane (PG) purifié, a été étudiée dans des cellules de la lignée AGS, ou de la lignée HEK293 transfectée, cultivées in vitro. L'imagerie des cellules infectées a été réalisée au beta-imager. Les infections expérimentales ont été conduites dans des souris produisant ou non la molécule Nod1.

Résultats

En mesurant l'activité luciférase d'un gène rapporteur Igkappa-luc introduit dans la lignée cellulaire HEK293, connue pour synthétiser de façon endogène la molécule Nod1, nous avons montré que l'activation du gène rapporteur était strictement dépendante de la fonctionnalité de l'îlot Cag. La co-transfection des cellules HEK293 par un dominant négatif de Nod1 abroge l'induction de l'activité luciférase dépendante de NF-kappaB par les souches de Hp PAI+. Dans les cellules HEK293, cette activation est médiée par l'internalisation du peptidoglycane (PG) de Hp. Un mutant de Hp défectif pour l'activité transglycosylase, responsable du renouvellement et du relargage du PG, est affecté dans sa capacité à induire NF-kappaB dans les cellules épithéliales. Chez Hp, la translocation dans les cellules AGS du PG marqué au tritium a été révélée par beta-imager ; cette translocation est dépendante de l'îlot Cag. Enfin, des souris déficientes en Nod1 sont plus sensibles à l'infection à Hp que les lignées parentales, une observation qui souligne le rôle de Nod1 dans la défense de l'hôte.

Conclusion

La molécule intra-cytoplasmique Nod1 répond spécifiquement au PG de Hp transloqué dans les cellules épithéliales par l'appareil de sécrétion codé par l'îlot Cag.