Résumé selectionné

Les gènes Wnt codent une large famille de protéines secrétées qui joue un rôle clef dans le développement par le contrôle du devenir et de la prolifération cellulaire. Par ailleurs, une activation inappropriée de cette voie de signalisation par invalidation du gène suppresseur de tumeur Apc (Adenomatous Polyposis Coli) dans le foie murin a été montrée oncogénique par notre équipe (Colnot S et al ; soumis). L'invalidation germinale d'Apc entraîne des anomalies de empêchant la gastrulation. De récentes publications confèrent à la signalisation Wnt/β-caténine des fonctions dans la prolifération des hépatoblastes et dans le lignage cellulaire, entraînant en culture une différenciation biliaire (1). Le but de notre étude a donc été d'étudier le phénotype d'embryons présentant une activation de la voie Wnt/β-caténine dans le foie murin à partir de 8,5 jours de vie embryonnaire.

Nous avons choisi d'étudier le rôle d' Apc par stratégie d'invalidation conditionnelle dans le foie murin, utilisant une stratégie de type Cre-loxP. Nous avons construit un modèle mutant conditionnel, homozygote floxé sur les allèles d'Apc (Apc^flox/flox). Afin de cibler spécifiquement le foie embryonnaire, nous avons croisé ces souris avec des souris exprimant la recombinase Cre dans le foie embryonnaire à partir de 8,5 jours de gestation (promoteur chimérique albumine/alpha fœto protéine).

L'invalidation hépatique d'Apc est létale embryonnaire à 17,5 jours de gestation. Cette létalité est accompagnée d'une absence de construction hépatique.

A 14,5 jours de gestation, l'architecture hépatique est très modifiée avec la présence d'îlots cellulaires présentant une forte activation de la voie Wnt/β-caténine mise en évidence par le marquage nucléaire et cytoplasmique de la β-caténine et le marquage intense par la glutamine synthétase. Par ailleurs, ces îlots ne prolifèrent pas et ne sont pas le siège d'une activité apoptotique. La caractérisation de ces îlots sur coupe à permis d'affirmer qu'il n'existe pas de différenciation biliaire (CK19, pan-CK, et activité enzymatique GGT négatifs), que ce ne sont pas des cellules hématopoïétiques (Ter119, CD45, CD11b et CD41 négatifs) et qu'il n'existe pas de transdifférenciation pancréatique (Pdx1, amylase, insuline et glucagon négatifs).

L'activation embryonnaire de la voie Wnt/β-caténine entraîne des anomalies architecturales aboutissant à la létalité embryonnaire et n'entraîne pas de différenciation biliaire des hépatoblastes.