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Etude du transport de la citrulline à travers le modèle de culture cellulaire Caco-2
S Bahri (1); E Curis (1); C Aussel (1); P Arnaud (1); C Moinard (1); L Cynober (1); J Chaumeil (1); N Zerrouk (1); (1) Paris V - FRANCE Mots clés : 16 Biologie De L'entérocyte,Transport Épithélial, Absorption | ||||
IntroductionL’administration entérale de la citrulline (Cit) peut être avantageuse dans certaines situations d’insuffisance intestinale. Cependant, la biodisponibilité tissulaire et l’action de la Cit sont conditionnées par son absorption intestinale. Celle-ci reste mal connue puisque les données expérimentales sur le transport de la Cit sont limitées à quelques travaux. Matériels et MéthodesLes cellulesCaco-2 sont cultivées sur des filtres microporeux pendant 21 jours. La captation de la [14C] -L-Cit (200 µM) a été étudiée au niveau des cellules différenciées. Les paramètres suivants ont été évalués : temps de transport, dépendance à la température (4°C et 37°C), la dépendance au pH (pH entre 6 et 8.5), la dépendance au Na+ étudiée en présence (tampon Na+-Krebs) et en absence de Na+ (tampon Choline-Krebs) et l’étude de la cinétique de transport (Km et V max). Les résultats sont exprimés en moyenne ± SEM. RésultatsLa captation de la [14C] -L-Cit est linéaire jusqu’à 15 min (p ≤ 0.05, régression linéaire) et inhibée à 4°C (0.147 ± 0 .008 vs. 1.51 ± 0.01 nmol.mg prot-1.min-1 à 37°C, p ≤ 0.05, n = 6, test- t). La variation du pH extracellulaire a montré un effet du pH sur la captation de la Cit (p ≤ 0.05, ANOVA à deux facteurs). Le transport Na+ -dépendant est saturable et indique un Km de 0.47 ± 0.04 mM et un Vmax de 3.85 ± 0.3 nmol.mg prot-1.min-1. En absence de Na+, la captation de la [14C] -L-Cit est significativement réduite et linéaire suggérant une diffusion passive (p ≤ 0.05) . ConclusionLe transport de la citrulline est un transport actif, Na+- dépendant et pH- dépendant s’apparentant au système A donc différent de celui de l’arginine. |
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