© SNFGE, 2006
Société Nationale Française de Gastro-Entérologie Envoyer à un ami Imprimer

Résumé selectionné

mardi 21 mars 2006
Poster


Etude du transport de la citrulline à travers le modèle de culture cellulaire Caco-2

S Bahri (1); E Curis (1); C Aussel (1); P Arnaud (1); C Moinard (1); L Cynober (1); J Chaumeil (1); N Zerrouk (1);

(1) Paris V - FRANCE


Mots clés :
16 Biologie De L'entérocyte,Transport Épithélial, Absorption

Introduction

L’administration entérale de la citrulline (Cit) peut être avantageuse dans certaines situations d’insuffisance intestinale. Cependant, la biodisponibilité tissulaire et l’action de la Cit sont conditionnées par son absorption intestinale. Celle-ci reste mal connue puisque les données expérimentales sur le transport de la Cit sont limitées à quelques travaux.

Le but de ce travail est d'étudier la captation cellulaire de la Cit par les cellules Caco-2/TC 7 et de caractériser les systèmes de transport mis en jeu.

Matériels et Méthodes

Les cellulesCaco-2 sont cultivées sur des filtres microporeux pendant 21 jours. La captation de la [14C] -L-Cit (200 µM) a été étudiée au niveau des cellules différenciées. Les paramètres suivants ont été évalués : temps de transport, dépendance à la température (4°C et 37°C), la dépendance au pH (pH entre 6 et 8.5), la dépendance au Na+ étudiée en présence (tampon Na+-Krebs) et en absence de Na+ (tampon Choline-Krebs) et l’étude de la cinétique de transport (Km et V max). Les résultats sont exprimés en moyenne ± SEM.

Résultats

La captation de la [14C] -L-Cit est linéaire jusqu’à 15 min (p ≤ 0.05, régression linéaire) et inhibée à 4°C (0.147 ± 0 .008 vs. 1.51 ± 0.01 nmol.mg prot-1.min-1 à 37°C, p ≤ 0.05, n = 6, test- t). La variation du pH extracellulaire a montré un effet du pH sur la captation de la Cit (p ≤ 0.05, ANOVA à deux facteurs). Le transport Na+ -dépendant est saturable et indique un Km de 0.47 ± 0.04 mM et un Vmax de 3.85 ± 0.3 nmol.mg prot-1.min-1. En absence de Na+, la captation de la [14C] -L-Cit est significativement réduite et linéaire suggérant une diffusion passive (p ≤ 0.05) .

Conclusion

Le transport de la citrulline est un transport actif, Na+- dépendant et pH- dépendant s’apparentant au système A donc différent de celui de l’arginine.

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