Résumé selectionné

Introduction

Nos travaux portent sur l'étude du rôle joué par la protéine ArgBP2 dans le développement du cancer du pancréas. Nous nous employons à déterminer quelles sont ses fonctions dans la cellule normale et pour quelles raisons la transformation maligne du pancréas s'accompagne d'une perte d'expression d'ArgBP2.

Matériels et Méthodes

Nous avons développé des outils de détection d'ArgBP2, notamment des anticorps poly et monoclonaux. Afin de déterminer l’implication d’ArgBP2 dans le cancer du pancréas, nous avons évalué l’impact de sa sur ou sous expression sur le comportement de cellules cancéreuses pancréatiques. Pour cela, nous avons créé des cellules MiaPaCa transgéniques chez lesquelles l’expression d’ArgBP2 est induite par la Ponasterone. Nous avons aussi développé un siRNA qui bloque l'expression d'ArgBP2. Enfin, ArgBP2 est une protéine multi-adaptatrice, contenant plusieurs domaines d'interaction protéine-protéine, qui est phosphorylée par la kinase c-Abl. Nous avons recherché ses partenaires par la technique du double hybride chez la levure (CytoTrap). Nous avons étudié le rôle de la phosphorylation d'ArgBP2 par mutagenèse dirigée des résidus tyrosines impliqués.

Résultats

L'étude du profil d'expression d'ArgBP2, à l'aide d'un "Tissue Micro Array" contenant 150 échantillons de tumeurs pancréatiques de divers grades (80 adénocarcinomes, 30 TIMPs, 20 neuroendocrines, 20 métastatiques), nous a permis de constater la perte d'expression d'ArgBP2 dans la plupart des tissus cancéreux. D'autre part, l'étude de la tumorigénicité des cellules MiaPaCa transgéniques, injectées chez la souris NUDE par voie sous-cutanée ou intra-pancréatique, nous a permis de mettre en évidence le rôle anti-tumoral d'ArgBP2. En effet, aucune tumeur sous-cutanée n'a été observée lorsque les cellules MiaPaCa sur expriment ArgBP2. De même, en injection intra-pancréatique, seule 60% des cellules MiaPaCa sur exprimant ArgBP2 ont développé des tumeurs de dimensions microscopiques. Les cellules contrôles ont formé des tumeurs macroscopiques dans 100% des cas. De plus, nous avons observé qu'ArgBP2 présente une co-localisation avec les fibres de tension ainsi que les adhésions focales de la cellule. Ceci suggère l'implication d'ArgBP2 dans la régulation de la dynamique du cytosquelette d'actine. Ces observations sont en accord avec les caractéristiques des nouveaux partenaires moléculaires d'ArgBP2 que nous avons identifié par CytoTrap, WAVE1 et PTP-PEST. En effet, ceux-ci sont impliqués dans la régulation de la dynamique de l'actine. Nous avons aussi pu démontrer que la phosphorylation d'ArgBP2 régule sa fonction en modulant l'interaction avec ses partenaires.

Conclusion

L'ensemble des données que nous avons collecté démontre l'implication d'ArgBP2 dans la progression du cancer pancréatique, ce qui en fait une cible thérapeutique de choix.