Introduction

S'il existe déjà un test ELISA pour quantifier de manière spécifique la lipase pancréatique humaine (hPL) dans les liquides biologiques, ce n'est pas le cas pour la lipase pancréatique de porc (pPL), traitement substitutif de l'insuffisance pancréatique exocrine.
L'objectif de ce travail était de discriminer la lipase pancréatique humaine de la lipase pancréatique de porc (pPL) dans le contenu duodénal afin d'évaluer la quantité de pPL, réellement disponible dans le duodénum d'un patient traité.
 

 Matériels et Méthodes

Les activités de type lipase pancréatique étaient mesurées par la technique du pH-stat avec la tributyrine comme substrat à 37°C et à pH 8 (dans ces conditions l'hPL et la pPL ont la même activité spécifique de 8.000 UI/mg). La concentration totale en lipase pancréatique était calculée grâce à l'activité spécifique à partir de l'activité lipase totale mesurée. Le dosage quantitatif de l'hPL était réalisé par ELISA (utilisation d'un anticorps monoclonal biotynilé : mAb 140-146). La lipase pancréatique de porc était égale à la différence entre la quantité de lipase totale (PL totale) et la lipase endogène. La méthode a été réalisée sur plusieurs types d'échantillons : enzymes pures en solution, hPL rajoutée à un extrait pancréatique en solution et du contenu duodénal recueilli in vivo chez un patient porteur d'un insuffisance pancréatique exocrine sévère après ingestion d'un extrait pancréatique. Les micro-granules d'extrait ont été administrés par une sonde gastrique avec un repas test. Le contenu duodénal a été collecté par fractions de 15 minutes grâce à une deuxième sonde placée au niveau de l'angle de Treitz.
 

 Résultats

Il n'y avait pas de réaction croisée entre l'hPL et la pPL pour notre anticorps (immuno-empreinte). Le test ELISA (dosage quantitatif de l'hPL) s'est révélé fiable en présence de pPL (pure ou bien contenue dans un extrait pancréatique). L'étude in vivo a mis l'accent sur l'importance de la variabilité intra-individuelle du pH duodénal. Elle a montré l'existence d'un pic duodénal de PL totale, fonction du délai de vidange gastrique. Ce pic, indépendant de la lipase endogène, correspondait à l'arrivée dans le duodénum de l'extrait pancréatique ingéré. L'effondrement secondaire de la PL totale du à la destruction de la pPL était imputable à la chute du pH (destruction de la pPL au dessous de pH 4).
 

 Discussion

Cette méthode permet d'étudier, pour la première fois, finement la quantité d'extrait réellement active au niveau du duodénum ; reste à corréler cette quantité à l'efficacité en terme de lipolyse duodénale.
 

 Conclusion

La combinaison de la mesure des activités de type lipase et du dosage pondéral de la lipase pancréatique humaine par ELISA a permis de quantifier parfaitement la lipase pancréatique de porc en présence de lipase pancréatique humaine dans le contenu duodénal aussi bien in vitro qu'in vivo.