Introduction

La fibrose et les sténoses intestinales sont des complications fréquentes de la maladie de Crohn (MC). L'étiologie exacte reste mal comprise cependant, une accumulation excessive de collagène au sein de la paroi intestinale de même qu'une prolifération des myofibroblastes pourraient y contribuer. TRAIL (TNF-related-apoptosis-indicing-ligand) se lie à 2 récepteurs proapoptotiques (TRAIL-R1, TRAIL-R2) et à 3 récepteurs antiapoptotiques (TRAIL-R3, TRAIL-R4 et OPG <ostéoprotégérine> un récepteur soluble). TRAIL induit l'apoptose de cellules tumorales et plus rarement de cellules non transformées. Le but de notre travail est l'étude de l'expression et du rôle de TRAIL dans la MC.
 

 Matériels et Méthodes

Des fibroblastes intestinaux ont été isolés (6 contrôles, 9 patients MC en zone saine et sténosée) et caractérisés par immunohistochimie. Nous avons extrait l'ARN des fibroblastes et de la paroi intestinale totale (7 sujets sains, 10 MC en zone saine et sténosée) et étudié l'expression de TRAIL et de ses récepteurs par RT-PCR en temps réel. L'étude des protéines s'est faite par immunohistochimie (11 contrôles, 28 MC en zones saines et sténosées, 10 RCUH, 11 diverticulites). La survie des fibroblastes après stimulation par TRAIL a été étudiée par MTS. Des Western Blot (WB) pour PARP (Poly ADP-ribose Polymérase) et la caspase 8 ont été réalisés afin d'étudier l'apoptose. L'influence d'OPG et des cytokines proinflammatoires sur l'apoptose a été analysée. Les taux d'OPG dans l'intestin ont été obtenus par ELISA spécifique sur les surnageants de milieux de culture de biopsies coliques (15 MC et 7 contrôles).
 

 Résultats

Les RT-PCR en temps réel ont confirmé l'expression de TRAIL et de ses récepteurs pro et antiapoptotiques au sein de la paroi intestinale et des fibroblastes coliques. Nous avons observé par immunohistochimie une expression intestinale importante de TRAIL, TRAIL-R1 et TRAIL-R3 principalement au niveau des cellules inflammatoires mononuclées, des fibroblastes et des cellules épithéliales. Cette expression n'est pas spécifique de la MC. TRAIL induit l'apoptose des fibroblastes intestinaux chez des sujets sains ou atteints de MC. L'apoptose a été confirmée par les WB PARP et caspase 8. OPG inhibe l'apoptose médiée par TRAIL mais on n'a observé aucune influence des cytokines proinflammatoires. Les taux d'OPG intestinaux étaient significativement plus élevés en cas de MC, particulièrement dans les zones inflammatoires.
 

 Conclusion

Il y a une expression de TRAIL, TRAIL-R1 et TRAIL-R3 dans l'intestin. TRAIL est susceptible d'induire l'apoptose des fibroblastes coliques. Cet effet est inhibé par OPG. Une diminution de l'apoptose médiée par TRAIL dans l'intestin due à un excès d'OPG pourrait être responsable de l'accumulation des fibroblastes au sein des zones de sténoses. Cette étude suggère que TRAIL et OPG pourraient être impliqués dans la physiopathologie des sténoses dans la MC.