Introduction

ArgBP2 est une protéine multi-adaptatrice dont la répression de l'expression lors du cancer pancréatique corrèle avec le degré d'avancement de la maladie et est en partie responsable du phénotype des cellules cancéreuses. Notre but est de déterminer les fonctions remplies par ArgBP2 dans la cellule pancréatique normale afin d'identifier de nouvelles voies importantes pour la dérivation maligne.
 

 Matériels et Méthodes

Afin d'identifier les partenaires d'ArgBP2, nous utilisons deux techniques complémentaires : le double hybride chez la levure "CytoTrap" et le GST pull-down suivi d'analyse par spectrométrie de masse. Nous tentons d'identifier les motifs ou domaines impliqués dans ces interactions par la technique du phage display et par mutagenèse dirigée. Nous étudions aussi l'impact des modifications post-traductionnelles sur ces interactions, et réciproquement, par mutagenèse des sites modifiés. Nous tentons ensuite d'identifier les fonctions biologiques associées à ces interactions par la création de modèles cellulaires adaptés. Nous étudions notamment l'effet de ces interactions sur la localisation subcellulaire des complexes, la régulation du cytosquelette, la prolifération et l'apoptose. L'importance de ces nouvelles interactions pour le phénotype transformé des cellules cancéreuses pancréatiques est évaluée par des tests de tumorigénicité chez la souris immunodéprimée NUDE.
 

 Résultats

Nous avons identifié un grand nombre de nouveaux partenaires d'ArgBP2 qui sont impliqués dans des fonctions cellulaires variées : la régulation du cytosquelette d'actine et de tubuline ; la modulation de modifications post- traductionnelles de protéines ; la transduction de signaux ; les métabolismes des lipides et de l'ADN/ARN. Nous avons débuté l'étude de l'interaction d'ArgBP2 avec deux protéines adaptatrices impliquées dans la régulation de l'organisation du cytosquelette d'actine et la transduction de signaux (CIP4 et Enigma), et une enzyme impliquée dans la synthèse de la phosphatidyléthanolamine (PCYT2). Nous avons pu déterminer le mode d'interaction de ces protéines entre elles en identifiant les domaines et régions protéiques impliqués. De plus, nous avons observé une influence de l'interaction d'ArgBP2 avec ses partenaires sur leur phosphorylation par la kinase c-Abl. Enfin, l'étude des fonctions cellulaires associées à ces interactions montre qu' ArgBP2 à effectivement la capacité, par l'intermédiaire de ses protéines associées, de réguler de nombreuses caractéristiques des cellules cancéreuses pancréatiques.
 

 Discussion

Ces résultats montre qu' ArgBP2, de part ses interactions avec de multiples partenaires moléculaires, est impliquée dans la régulation de nombreuses fonctions cellulaires qui se trouvent être altérées lors de la transformation maligne.
 

 Conclusion

L'identification des voies régulées par ArgBP2 nous permettra de comprendre de quelles façons la perte d'expression d'ArgBP2 accroît l'agressivité des cellules cancéreuses pancréatiques et nous amènera sans doute à identifier de nouvelles cibles thérapeutiques.